लेखक: Roger Morrison
निर्माण की तारीख: 19 सितंबर 2021
डेट अपडेट करें: 11 मई 2024
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माइक्रोबायोलॉजी में सीरियल Dilutions कैसे करें
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विषय

इस आलेख में: एक साधारण कमजोर पड़ने का प्रदर्शन करें अंतिम कमजोर पड़ने वाले कारक और कंसंट्रेशन 8 का संदर्भ लें

रसायन विज्ञान में, एक कमजोर पड़ने से किसी दिए गए समाधान की एकाग्रता कम हो जाती है। एक सीरियल कमजोर पड़ने बस एक मूल समाधान के दोहराया कमजोर पड़ने तेजी से कमजोर पड़ने कारक बढ़ाना है। इस तरह के कमजोर पड़ने को अक्सर प्रयोगों के दौरान अत्यधिक पतला समाधान और उच्च सटीकता की आवश्यकता होती है, जैसे कि लॉग स्केल पर एकाग्रता घटता है या जो कुछ मीडिया में बैक्टीरिया के घनत्व की गणना करने की अनुमति देते हैं। वे अक्सर जैव रसायन, सूक्ष्म जीव विज्ञान, औषध विज्ञान या रसायन विज्ञान में प्रदर्शन किए जाते हैं।


चरणों

विधि 1 एक सरल कमजोर पड़ने की क्रिया करें



  1. सही पतला तरल (या मंद) निर्धारित करें। मंदक का चुनाव बहुत महत्वपूर्ण है और उस समाधान पर निर्भर करता है जिसे आप पतला करना चाहते हैं। मंदक अक्सर आसुत जल है, लेकिन यह व्यवस्थित नहीं है। इस प्रकार, बैक्टीरिया या कोशिकाओं वाले समाधान के साथ, इसके बजाय एक संस्कृति माध्यम का उपयोग किया जाता है। धारावाहिक कमजोर पड़ने के लिए, सभी नलियों में एक ही मंदक का उपयोग किया जाता है।
    • यदि आप अनिश्चित हैं कि किस मंदता का उपयोग करना है, तो किसी सक्षम व्यक्ति की मदद लें या इंटरनेट पर देखें कि लोगों को एक समान अनुभव के लिए क्या करना है।


  2. एक कमजोर तरल के 9 मिलीलीटर युक्त कई परीक्षण ट्यूब तैयार करें। इन परीक्षण ट्यूबों का उपयोग क्रमिक dilutions बनाने के लिए किया जाएगा। सिद्धांत सरल है, आप शुरुआती समाधान का एक नमूना लेंगे और इसे अगली ट्यूब में स्थानांतरित करेंगे, फिर इस ट्यूब का एक नमूना लें इसे अगले में डाल दें, आदि।
    • Dilutions शुरू करने से पहले, बाद में भ्रम से बचने के लिए परीक्षण ट्यूबों को पहले से पहचानना उचित है।
    • प्रत्येक ट्यूब में, आपके पास पिछले एक की तुलना में दस कम एकाग्रता होगी। पहली ट्यूब में दसवें, दूसरे, सौवें, तीसरे, हजारवें और इसी तरह एक पतला समाधान होगा। आवश्यकता से अधिक ट्यूब बनाने से बचने के लिए पहले से ही dilutions की संख्या का निर्धारण करें और अनावश्यक रूप से अपशिष्ट को बर्बाद करें।



  3. अपनी माँ के समाधान के साथ एक टेस्ट ट्यूब तैयार करें। कम से कम 2 मि.ली. सीरियल कमजोर पड़ने के लिए स्टॉक समाधान की न्यूनतम मात्रा एक मिलीलीटर है। एक दूसरे संभव कमजोर पड़ने के लिए 2 मिलीलीटर की अनुमति दें। माँ समाधान की यह ट्यूब, आप इसे "एसएम" चिह्नित कर सकते हैं।
    • एक धारावाहिक कमजोर पड़ने से पहले, शुरुआती समाधान को अच्छी तरह मिलाएं।


  4. पहले पतला कर लें। "एसएम" लेबल वाली टेस्ट ट्यूब में स्टॉक समाधान के पिपेट 1 मिलीलीटर और लेबल किए गए टेस्ट ट्यूब में इस राशि को स्थानांतरित करें। 1/10 जिसमें पहले से ही 9 मिलीलीटर पतला तरल होता है। एक सजातीय समाधान प्राप्त करने के लिए मिलाएं। इस ट्यूब में, अब 10 मिलीलीटर समाधान है: स्टॉक समाधान का 1 मिलीलीटर और कमजोर पड़ने वाले तरल का 9 मिलीलीटर। यह नया समाधान पिछले वाले की तुलना में दस गुना कम केंद्रित है।



  5. दूसरा कमजोर पड़ने पर प्रदर्शन करें। दूसरे सीरियल कमजोर पड़ने में, आप लेबल किए गए ट्यूब समाधान के 1 मिलीलीटर को आकर्षित करेंगे 1/10 और आप इसे ट्यूब में डाल देंगे 1/100 जिसमें पहले से ही 9 मिलीलीटर पतला तरल होता है। ट्यूब 1/10 सैंपलिंग से पहले अच्छी तरह मिलाया जाएगा। एक बार जब स्थानांतरण हो जाता है, तो ट्यूब को अच्छी तरह से मिलाएं 1/100। चिह्नित ट्यूब से समाधान 1/10 लेबल ट्यूब की तुलना में 10 गुना अधिक केंद्रित है 1/100.


  6. यदि आवश्यक हो तो इस हेरफेर को दोहराएं। इस प्रक्रिया को वांछित कमजोर पड़ने तक वांछित के रूप में कई बार दोहराया जा सकता है। एकाग्रता घटता से जुड़े एक प्रयोग के लिए, आप इस प्रकार इकाई को दसवें (1/10), सौवें (1/100) या हज़ारवें (1/1000) के साथ समाधान की एक श्रृंखला प्राप्त कर सकते हैं।

विधि 2 अंतिम कमजोर पड़ने वाले कारक और एकाग्रता की गणना करें



  1. गणना करें अनुपात अंतिम कमजोर पड़ने के बाद धारावाहिक कमजोर पड़ने। कमजोर पड़ने वाले कारक को अपने आप से कई बार कमजोर पड़ने से गुणा करके प्राप्त करने का कुल अनुपात प्राप्त होता है। गणितीय रूप से, सूत्र इस प्रकार है: डीटी = डी1 एक्स डी2 एक्स डी3 x ... x Dnसाथ डीटी कुल कमजोर पड़ने वाले कारक का प्रतिनिधित्व करना और डीnकमजोर पड़ने का अनुपात।
    • तो, मान लें कि आप पंक्ति में 4 बार तरल के 1/10 कमजोर पड़ने का प्रदर्शन करते हैं। सूत्र में, कमजोर पड़ने वाले कारक को इसके मूल्य से बदलें: डीटी = 10 x 10 x 10 x 10 = 10,000
    • आपके सीरियल कमजोर पड़ने में चौथी ट्यूब का अंतिम कमजोर पड़ने का कारक 1/10 000 है। अंतिम ट्यूब के समाधान की एकाग्रता मूल समाधान की तुलना में अब 10 000 गुना कम है।


  2. कमजोर पड़ने के बाद एक समाधान की एकाग्रता का निर्धारण करें। धारावाहिक कमजोर पड़ने के बाद एक समाधान की अंतिम एकाग्रता को खोजने के लिए, आपको शुरुआती एकाग्रता को जानने की आवश्यकता है। सूत्र तब है: सीअंतिम = सीप्रारंभिक/ Aसाथ सीअंतिम पतला समाधान के टर्मिनल एकाग्रता का प्रतिनिधित्व, सीप्रारंभिकशेयर समाधान की एकाग्रता और डीअग्रिम में निर्धारित कमजोर पड़ने का अनुपात।
    • तो, यदि आप प्रति मिलीलीटर 1,000,000 कोशिकाओं की एकाग्रता के साथ एक सेल समाधान को पतला करते हैं और आपके कमजोर पड़ने का अनुपात 1,000 पर सेट किया गया है, तो आपके पतला नमूने की अंतिम एकाग्रता क्या होगी?
    • सूत्र का उपयोग करें:
      • सीअंतिम = सीप्रारंभिक/ A
      • सीअंतिम = 1 000 000/1 000
      • सीअंतिम = 1000 सेल / एमएल


  3. प्रयुक्त इकाइयों पर ध्यान दें। अपनी गणना करते समय, हमेशा जांचें कि आप एक ही इकाइयों का उपयोग कर रहे हैं। इस प्रकार, यदि आप प्रति मिलीलीटर कोशिकाओं की एकाग्रता से शुरू करते हैं, तो आपका अंतिम परिणाम प्रति मिलीलीटर कोशिकाओं में भी होगा। यदि आपकी शुरुआती एकाग्रता प्रति मिलियन (पीपीएम) भागों में है, तो आपकी अंतिम एकाग्रता प्रति मिलियन भागों में होगी।

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